怎样进行培养基高压湿热灭菌


怎么样进行培养基高压湿热灭菌(fungus)
培养基装管装瓶(袋)后,应立即进行消毒灭菌,如灭菌不彻底(thorough),就容易产生杂菌,给生产造成损失。


  (一)母种培养基灭菌(Sterilization)法
    母种培养基灭菌一般用手提式高压锅。灭菌时将试管7~10支扎成一捆,再用防潮(防止物品发霉变质)纸或牛皮纸包住试管棉塞,管口朝上,防止灭菌时棉塞潮湿。高压灭菌的时间,在1.2kg~1.5kg/cm2压力下保持15~20分钟即可。但在使用高压锅灭菌时还应注意如下事项:
    1.灭菌(Sterilization)(fungus)时锅中水要放**水线为止。如放水过少易引起烧干及烧焦培养基;如放水过多,棉塞易潮湿,以后易感染杂菌。
    2.锅内的冷空气必须(have to)排除干净,否则达不到灭菌的温度(temperature)。排除锅内冷空气的方法(method)有两种,一是将灭菌锅升火后,从开始出气起,经5分钟左右的排气,**从排气阀出的气达到直喷时,再关闭排气阀;另外一种是将排气阀关闭升火,待压力升到0.5kg/cm2时,打开排气阀,使含义:钟表中用来指示对应时间的部件降落到 ;0 ;后,再关闭气阀,烧**所需压力。
    3.灭菌时间不易过长或过短,过长养分易被破坏,培养基颜色发黄,对菌丝生长不利;过短则达不到灭菌的效果(xiàoguǒ)。灭菌结束后,放气速度不能太快,宜逐渐进行,使指针慢慢下降到 ;0 ;才揭开锅盖,否则棉塞容易冲出试管。
    在没有高压锅的条件(tiáo jiàn)下,可以用土蒸汽锅灭菌(Sterilization),但要相应延长灭菌时间,在100℃下的温度(temperature)应保持4~6小时。压力蒸汽灭菌器具有造型新颖美观、结构合理、功能齐全、加热迅速、灭菌彻底等优点。适用于医疗、科研、食品、等单位对手术器械、敷料、玻璃器皿、橡胶制品、食品、药液、培养基等物品进行灭菌。为了灭菌彻底,可采用间歇灭菌法,每天水烧开后蒸煮1小时(100℃),连续(Continuity)三天。
    培养基灭菌结束后,应立即取出试管直立放置2~3分钟,待试管壁上的水珠回到培养基内后,再趁热搁置斜面。这样,试管壁上不会有大量的水珠,温度(temperature)适当。斜放时,一般使斜面为试管总长的二分之一**三分之一。放好后,再用纱布覆盖,防止冷却过程(guò chéng)中因温度急剧变化而使管壁形成水珠。
    经灭菌(fungus)后的斜面试管,必须在接种前于每一批或每锅中取出3~4支,放在28℃~30℃的恒温箱中培养2~3天作空白试验。生物安全柜可保护工作人员和环境而不保护样品。气流原理和实验室通风橱一样,不同之处在于排气口安装有HEPA过滤器。所有类型的生物安全柜都在排气和进气口使用HEPA过滤器。经培养后,斜面仍光洁透明,无杂菌或细菌出现,则表示灭菌彻底,可作接种用。如发现杂菌,则应找出原因,并将这批试管重新灭菌一次后方可使用。


  (二)原种、栽培种的高温灭菌(Sterilization)(fungus)
    原种、栽培种所需的数量多,灭菌(Sterilization)一般采用较大的立式压力蒸汽灭菌器。采用高压蒸汽锅进行湿热灭菌时,升温火力应逐渐加大,以防锅内温差变化太大,引起玻璃瓶炸裂破损。当压力开始升到0.5kg/cm2时,即打开排气(Exhaust)阀排出冷气,待冷空气(Basin air)放尽后,再关上排气阀重新升温,烧**所需压力。
    高压灭菌所需要的时间,应根据培养基原料的种类和生熟程度来决定长短。压力蒸汽灭菌器具有造型新颖美观、结构合理、功能齐全、加热迅速、灭菌彻底等优点。适用于医疗、科研、食品、等单位对手术器械、敷料、玻璃器皿、橡胶制品、食品、药液、培养基等物品进行灭菌。木屑、棉壳、蔗渣和种木为主料的培养基灭菌时的蒸汽压力要求达到1.5kg/cm2,保持60分钟;稻草培养基和粪草培养基,在同上的压力下,保持90分钟;而麦粒培养基则要保持120分钟,才能达到灭菌效果。
    采用土锅灭菌时,在98℃~100℃的温度下,需连续灭菌6~8小时;麦粒培养基的灭菌时间须达12小时为宜。停火后再焖蒸3~4小时才能出瓶(袋)。
    采用塑料(结构:合成树脂、增塑剂、稳定剂、色料)薄膜袋装菌种(Bacterial species)培养基灭菌时,可按以上方法(method)进行灭菌。聚乙烯耐压,耐温性能差,故只能采用常压灭菌,100℃保持8~12小时。聚丙烯塑料薄膜耐温、耐压性能好,可在1.5kg/cm2压力下保持2小时,灭菌彻底且不会破裂。灭菌后不要立即打开锅盖,待温度下降(descend)**50℃时趁热开锅取出,这样可减少每包粘连一起的现象。
    培养基灭菌完毕从锅中取出后,应放于清洁、凉爽、干燥(dry)的室内进行冷却(cooling)待接,并在棉塞上喷5%石炭酸或0.25%新洁尔灭溶液,以防杂菌感染。
 

 

WWW.BOXUN17.CN Corporation of China 2010上海博迅压力蒸汽灭菌器生物安全柜生化培养箱净化工作台高压灭菌器 公司简介 联系我们

客服电话
  • 15157563004
  • 15258505380