二级生物安全柜柜内操作需注意些什么


  1. 二级生物安全柜使用时首先用遥控器开启隔离窗,窗体警报器随即响起,当窗体向上滑动到合适的工作高度时,警报声解除,即可开始工作。
  2. 安全柜内不放与本次实验无关的物品(article),操作控制前应将实验所需的全部物品移入安全柜(工作用纸,小鼠垫料等易吹起的物品不许放在生物(biological)安全柜内以免阻塞回风隔栅),避免(avoid)操作中双臂(Arms)频繁穿过气幕破坏气流(airflow);并且在移入前用70%酒精擦拭表面消毒,消毒工作台面。压力蒸汽灭菌器具有造型新颖美观、结构合理、功能齐全、加热迅速、灭菌彻底等优点。适用于医疗、科研、食品、等单位对手术器械、敷料、玻璃器皿、橡胶制品、食品、药液、培养基等物品进行灭菌。柜内物品摆放应做到清洁(clean)区、半污染区与污染区分开,在柜内摆放的物品应该尽量呈横向一字摆开,操作中物品取用方便,避免回风过程中造成交叉污染。物品应尽量靠后放置,但不得挡住气道口,以免干扰气流正常流动。
  3. 打开风机5~10分钟,待柜内(Cabinet)空气净化并气流稳定(解释:稳固安定;没有变动)后再进行实验操作控制。将双臂应该垂直地缓缓伸入安全柜内,**少静止1分钟,使柜内气流稳定后再进行操作,柜内操作时手应该尽量平缓移动。操作中如确实需要拿出手臂或物品(article)进入,也应垂直地缓缓进出,且可能接触感染物品,要对手套及手臂进行表面(appearance)消毒;
  4. 避免震动原则:柜内尽量避免震动仪器(例如离心机、旋涡振荡器等)的使用,因为震动会使得积留在滤膜上的颗粒物质抖落,导致操作室内部洁净度降低,同时如果在前操作面平衡失败还会引起安全柜对操作者的污染。如必须则放置在靠近柜内后壁1/3处,洁净的物品应放置在距离产生气溶胶器皿**少150mm外。
  5. 不同样品柜内移动原则:操作和移动物品(article)时应按照从清洁区(低污染性物品)到污染区(高污染性物品)进行,以避免交叉污染。为防可能溅出的液滴,可在台面上铺一用消毒剂浸泡过的毛巾或纱布,但不能覆盖(Cover)住安全柜格栅。
  6. 二级生物安全柜内(Cabinet)操作期间,严禁使用酒精灯等明火,以避免产生的热气流干扰柜内气流稳定;且明火使用过程中产生的细小颗粒杂质将被带入滤膜区域,这些高温杂质会损伤HEPA滤膜。无法避免一定需要使用的时候,宜使用低火苗的本生灯。允许使用微型电加热器或红外灭菌(fungus)器,**好使用一次性无菌接种环;
  7. 工作时尽量减少背后人员走动以及快速开关(switch)房门,以防止安全柜内气流(airflow)不稳定(解释:稳固安定;没有变动)。
  8. 在实验操作控制时,不可打开玻璃材质视窗,应保证操作者脸部在工作窗口之上。操作尽量工作台中央,稀释(dilute)病毒样本必须在生物安全柜中,不可吹打,在旋涡混匀器上混匀,吹打产生的气溶胶极易造成整个试验环境的污染;将盛有样品的试管或试盘的表面密封以防止下沉气流侵袭样品。
  9. 二级生物安全(security)柜应定期进行检测与保养,以保证其正常工作(gōng zuò)。工作中一旦发现安全柜工作异常(例如持续气流报警,表明安全柜的正常气流模式受到了干扰,操作控制者或物品当即处于危险状态),应立即停止(stop)工作,采取相应处理措施,并通知P2管理员。
  10. 允许全天24小时工作。连续工作有助于控制实验室中灰尘和颗粒的水平(Level);推荐将安全(security)柜一直维持运行状态。工作完全后,关闭玻璃窗,保持风机继续运转10~15分钟,同时打开紫外灯,照射30分钟。
  11. 要丢弃的、感染的物品应暂时放在安全柜的后部;操作过程中避免(avoid)将要丢弃的物品放到安全柜外的容器内。生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时,用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料,使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。包括废弃物袋、盛放废弃吸管的盘子以及吸滤瓶等体积较大的物品,应放在某一侧不能拿出安全柜;将所有需要丢弃的物品放入黄色生物安全袋或废弃物容器内,严密封口后方可拿出;柜内使用的物品应在表面消毒后再取出,以防止将病原微生物带出而污染环境。
  12. 安全柜应定期进行清洁消毒,柜内台面污染物可在工作完成且紫外灯消毒后用2%的84消毒液擦拭。生物安全柜可保护工作人员和环境而不保护样品。气流原理和实验室通风橱一样,不同之处在于排气口安装有HEPA过滤器。所有类型的生物安全柜都在排气和进气口使用HEPA过滤器。也可用70%酒精并对工作台面、后壁、侧壁, 观察窗的内侧进行消毒;柜体外表面则应每天用1%的84消毒液擦拭。甲醛蒸汽熏蒸是清除污染**常用的方法。

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