常用的灭菌方法


常用的灭菌(fungus)方法
1、热力灭菌(Sterilization):利用高温使菌体蛋白(protein)质变性或凝固(solidification),代谢发生障碍, 导致细菌死亡。包括:
    (1)焚烧法:用火焚烧,是很彻底(thorough)的灭菌方法,适用于废弃的感染物品和有传染性的动物尸体等。
    (2)烧灼法:直接再火焰上烧灼,用于接种环(针)和试管口或瓶口的灭菌(Sterilization)。生物安全柜可保护工作人员和环境而不保护样品。气流原理和实验室通风橱一样,不同之处在于排气口安装有HEPA过滤器。所有类型的生物安全柜都在排气和进气口使用HEPA过滤器。
    (3)干烤法:在干烤箱通电后利用高热空气(Basin air)进行灭菌。生物安全柜可保护工作人员和环境而不保护样品。气流原理和实验室通风橱一样,不同之处在于排气口安装有HEPA过滤器。所有类型的生物安全柜都在排气和进气口使用HEPA过滤器。一般加热160-170℃, 维持2小时即可杀灭包括芽胞在内的一切微生物。主要用于玻璃器皿、 磁器或需干燥(dry)的注射器等。
    (4)煮沸法:煮沸100℃5分钟可杀死细菌的繁殖体,一般消毒(disinfection)以煮沸10分钟为宜。如需要杀死芽胞则要煮沸1-3小时。主要用于一般外科器械、注射器、胶管和食具等的消毒。
    (5)间歇灭菌(fungus)法:是利用反复多次的流通蒸汽, 杀死细菌所有繁殖体和芽胞(界:细菌界)的一种灭菌法。生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时,用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料,使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。本法适用于耐热物品,也适用于不耐热(<100℃)的一些物质如某些培养基的灭菌。具体做法是将待灭菌的物品置于阿诺氏流通蒸汽灭菌器内,100℃加热15-30分钟杀死其中的细菌繁殖体,然后将物品置37℃温箱中过夜,使芽胞发育成繁殖体,次日再通过(tōng guò)流通蒸汽加热,如此连续三次,可将所有繁殖体和芽胞全部杀死。若有某些物品不耐100℃,则可将温度降**75-80℃, 每次加热的时间延长**30-60分钟, 次数增**3次以上,也可达到灭菌目的,如用血清凝固器对血清培养基或卵黄培养基的灭菌。
    (6)巴氏消毒法:由巴斯德创建,常用于牛奶和酒类的消毒。一般加热61.1-62.8℃半小时, 或71.7℃经15-30秒钟, 便可达到杀死病原菌或一般杂菌, 而不严重破坏物品的质量的目的。
    (7)压力蒸汽灭菌器与蒸汽压力灭菌器法:是灭菌效果**好、目前应用**广的灭菌方法(method)。利用蒸汽压力灭菌器或者压力蒸汽灭菌器进行灭菌,由于密闭容器加温所产生的高压饱和水蒸汽能获得比较高的温度,通常在1.05kg/cm2的压力下, 温度达121.3℃, 维持15-30分钟, 可杀死包括特殊结构:荚膜、鞭毛、菌毛芽胞(界:细菌界)在内的所有微生物(Micro-Organism)。此法适用于高温和不怕潮湿物品的灭菌,如普通培养基、生理盐水、手术器械、注射器、手术衣、敷料和橡皮手套等。
     在同样温度下, 蒸汽压力灭菌器和压力蒸汽灭菌器的灭菌效果比干热灭菌好, 原因是:
    
  A、湿热中菌体吸收水份, 蛋白(protein)质较易凝固。
    
  B、湿热比干热的穿透力好, 这主要是由于水或饱和(saturation)水蒸汽传导热能的效率明显高于空气。蒸汽容易穿透到物体的深部, 使灭菌的物体内部温度迅速上升。
    
  C、蒸汽有潜热存在。每一克水在100℃时, 由气态变为液态可放出529卡的热量。当蒸汽与被灭菌(Sterilization)的物体接触时凝结成水, 放出潜热, 能迅速提高(灭菌物体的温度。
    
  2、紫外线灭菌(Sterilization):紫外线杀菌原理是通过干扰细菌DNA的合成, 波长2650-2660A杀菌力**强。紫外线作用的特点是
  (1)穿透力弱,只能用于房间空气、物体表面消毒(disinfection);
  (2)杀菌效果与照射时间, 距离和强度(strength)有关;
  (3)对眼睛角膜和皮肤(skin)有损伤作用,工作人员(personnel)切勿在紫外线(Ultraviolet rays)灯照射下进行操作控制。
     日光中含有大量紫外线。将病人的被褥、衣服、书报等放在强烈的日光下爆晒数小时, 可达到消毒的目的。

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