环氧乙烷压力蒸汽灭菌器灭菌试验操作程序


环氧(Oxygen)乙烷压力蒸汽灭菌(fungus)(Sterilization)器灭菌试验操作控制程序
 

  (1) 根据试验要求,制备枯草杆菌(fungus)黑色变种芽孢悬液和菌片。菌片放入双层聚乙烯塑料袋内密封包装,每袋 2 片。每次试验用 20 袋。

  (2) 将灭菌器上、中、下 3 层,每层内、中、外各设一点,共设 9 点。压力蒸汽灭菌器具有造型新颖美观、结构合理、功能齐全、加热迅速、灭菌彻底等优点。适用于医疗、科研、食品、等单位对手术器械、敷料、玻璃器皿、橡胶制品、食品、药液、培养基等物品进行灭菌。生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时,用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料,使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。每点物品(article)中间布放1 袋,共需 18 袋试验菌片。另将一袋(2 片)菌片放置在室温条件(tiáo jiàn)下作为阳性对照。

  (3)按使用(use)说明书所规定(guī dìng)的环氧(Oxygen)乙烷浓度、作用时间、柜内(Cabinet)的温度和相对湿度(shī dù),在满载条件(tiáo jiàn)下进行环氧乙烷灭菌(fungus)处理。满载用物品(article),随灭菌器用途而定。处理完毕,取出菌片,分别移种于 5 ML 营养(nutrition)肉汤培养基中,置 37℃ 培养箱内培养,7 D后观察**终结果(定性培养检测)。

对难以判断结果(result)的营养(nutrition)肉汤管,取其中 0.2ML 悬液接种营养琼脂平板, 用无菌(fungus)L 棒涂抹均匀(jūn yún), 置 37℃ 培养箱内培养。生物安全柜是为操作原代培养物、菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时,用来保护操作者本人、实验室环境以及实验材料,使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。48H后涂片染色,显微镜下观察菌落形态(pattern),或进一步做其他试验,判断有无生长(Grow)或生长的是否为试验菌。若为非试验菌,则应重新进行试验。

  (4) 测试中,应同时设立定性和定量阳性对照组(菌片对照)与阴性对照组(培养基对照)。

  (5) 定量阳性对照组,以同批试验用菌(fungus)片置室温下,待消毒(disinfection)或灭菌试验组达规定作用时间后,立即将该菌片 2 片分别放入含 5.0ML PBS 试管中,各振敲 80 下。取洗液进行活菌培养计数。

  (6) 定性阳性对照组,以同批试验用菌(fungus)片置室温下,待灭菌试验组达规定(guī dìng)作用时间后,立即将该菌片 2 片,分别接种于 5.0ML 营养(nutrition)肉汤培养基,放入温箱中作定性培养,观察有细菌生长情况。

  (7) 阴性对照组,以同批次试验用未染菌(fungus)样片 2 片,分别接种于 5.0ML营养(nutrition)肉汤培养基,同时将未接种过的营养肉汤培养基放入培养箱中作定性培养,观察有无细菌生长。

  (8) 试验重复 5 次。

  (9)在5次试验中,每次试验中的阳性对照菌(fungus)片,回收菌量均应在5×`10^5`CFU/片~5×`10^6`CFU/片;定性阳性对照组,细菌生长良好;阴性对照应无菌生长。阳性或阴性对照若有不符合上述要求的结果,试验作废,重新进行。

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